中文版
English
加入收藏
支原体污染
支原体是一类缺乏细胞壁呈高度多形性的原核细胞型微生物,大小为0.1~0.3微米,所以除菌滤器无法正常对支原体进行滤除,是目前所知能在无生命培养基中生长繁殖的最小的微生物。在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。
支原体污染的影响:
1、影响细胞的生长状态及形态
支原体可使培养液中支持细胞生长的营养物质含量减少,造成细胞生长缓慢甚至停止;细
胞状态变差,生长变慢,在显微镜下观察可能会有小黑点,但培养基一般不发生浑浊。会导
致细胞微管解聚,引起细胞一系列病变,表现为细胞收缩、贴壁细胞脱落、裂解等。细胞传
代以后就出现细胞间黑点,细胞空泡化,很多类似凋亡、坏死的细胞,最终细胞漂浮,完全
死亡。
2.影响细胞的代谢和功能
培养液中的精氨酸被支原体大量消耗,引起细胞蛋白质、DNA、rRNA、mRNA的合成障碍;支原体活动使培养基成分发生改变,影响细胞代谢;支原体吸附在细胞表面,破坏细胞膜的完整性,影响细胞信号传递;支原体消耗细胞的核苷库—染色体异常。
3、其他
此外,支原体污染还会影响一些病毒在细胞中的产量、使恶性细胞致癌能力下降、影响
淋巴细胞分化等。
支原体污染来源:
包括工作环境的污染、操作者本身的污染、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。
预防及处理:
控制环境污染、严格实验操作、细胞培养基和器材要保证无菌、在细胞培养基中加入适量的抗生素。