中文版 English 加入收藏

耗材常说的无热原、无核酶、无内毒素究竟是什么意思

不知道大家平时有没有经常采购耗材的需求,如果是经常采购实验室耗材的人可能会发现,各个厂家可能都会给产品标榜上无酶无热原、无内毒素的标签,
特别是涉及到一些细胞生物学和分析生物学的耗材更是如此,例如常见的15ml和50ml离心管、细胞培养瓶、细胞培养皿、细胞培养板、冻存管、PCR板等
等产品。而有这些描述的产品通常可能也会比普通的同类产品贵一些。那么这些说法到底是什么意思,又对我们的实验有什么影响呢?我们
平时在进行采购的时候应该如何进行选择,这里就给大家简单介绍下。




定义


1


热原


热原指注入机体后能引起人体体温异常升高的致热物质。广义的热原包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。这里所指的
“热原”,主要是指细菌性热原,是某些微生物的代谢产物、细菌尸体及内毒素。




2



酶大家在初中就学过,作为一种生物催化剂,酶能够高效催化我们生物体内各种生化反应的进行。然而大部分产品所说的无酶,实际上更准确点说并不是指
所有酶,而是指核酸酶,很多厂家也写成DNase-free和RNase-free,都是代表的一个意思。核酸酶能够分解核酸分子,有专一性降解DNA或RNA,也有专
一性较低可同时作用于DNA和RNA分子的酶。




3


内毒素


内毒素为革兰氏阴性菌的菌体中存在的毒性物质的总称。是多种革兰氏阴性菌的细胞壁成分,由菌体裂解后释出的毒素,成分为脂多糖。一般认为内毒素为热
原的一种,药品生产的时候通常可以接受:不存在内毒素则不存在热原,因此在生产的时候可能只进行内毒素检测而不进行热原检测。








影响






热原和内毒素能够刺激机体,引起机体发热。在制药、临床等领域,为了人的安全,通常对热原和内毒素的量有所要求。在中国药典中对于热原和内毒素的检
测也都给到了明确的方法。而核酸酶在涉及到分子学实验室的时候,因为其具有分解DNA的作用,很可能使目标分子片段被降解,例如PCR实验中,如果收到
核酸酶的污染有可能无CT值,从而产生假阳性的结果。所以像吸头、PCR相关的耗材通常都是无核酸酶的。




关于热原和内毒素的检测




下面简单介绍下药典中对热原和内毒素检测的内容。




1


热原检测


中国药典1142通则中描述了使用家兔法进行热原检测。使用健康合格的家兔,将一定剂量的供试品,静脉注入家兔体内,在规定时间内,观察家兔体温升高的
情况。与供试品接触的试验用器皿应无菌、无热原。去除热原通常釆用干热灭菌法(250℃、30分钟以上),也可用其他适宜的方法。如果受试的家兔在一定
时间内的体温升高到一定标准,则认为供试品的热原检查不符合规定。




2


内毒素检测


内毒素检测以前国际上都使用鲎试剂法进行检测。具体方法有凝胶法和光度测定法,鲎试剂可以与细菌内毒素发生凝集反应,产生凝胶或者发生浊度变化,通过测
定这种变化测定内毒素含量。鲎试剂是从海洋节肢动物鲎的血液中提取制成的一种试剂,因此鲎在世界范围内遭到大量捕杀,在我国也成为了国家二级保护动物。
目前FDA已经批准了重组C因子法,替代了鲎试剂。我国药典的指导原则中也已提到该法。








如何进行选择






其实了解了这几个概念之后如何进行选择也就不难了。主要还是根据自己的需求来选择。通常无酶和热原的耗材较为常见,无内毒素的产品相对较少。如果实验
本身对于这些没有较高要求,其实可以选用普通耗材,举个例子在做离心的时候,如果是离心细胞或者相关成分最好选用无酶和热原的离心管,而如果只是普通
的液体离心实际上普通离心管即可。




另外这也是很多使用者会产生的问题,就是在向一些商家采购离心管的时候会问该离心管能否重复使用,这个问题实际上要因情况而议,因为离心管在使用过一
次之后就已经在一定程度上被污染了,而且即使进行压力蒸汽灭菌也无法完全消除这些污染,因此再次使用的话需要看使用者自己对实验的需求了。




归根结底,所有的产品都是为实验者和实验服务,不能因为产品而影响自己的实验,而是需要根据自己的实验去选择合适的和产品即可。


以上为内容导读,完整内容请点击下方图标下载