01

透析

透析，一种小分子能够在半透膜上的孔自由通过，大分子不能通过该孔而被截留在半透膜内，实现大分子物质和小分子物质分离纯化的实验方法；

透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。

保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”

02

透析分离物质的优缺点

优点

样品回收率高；操作简单，无需繁琐准备工作；分离条件温和。

缺点

耗时较长；样品和杂质之间的分子量差较大。

03

干型透析袋使用方法

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1

剪取适当长度的透析袋（如10cm）；

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2

在大体积（500ml）的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA.2Na (pH 8.0)中，将其煮沸10分钟；

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3

取出后用蒸馏水彻底清洗透析袋；

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4

再放在500ml的1mmol/L EDTA.2Na(pH 8.0)中将其煮沸10分钟，取出后再用蒸馏水彻底清洗；

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5

暂不使用的话需要将透析袋完全浸泡到透析袋储存液中，可存放于4-37度；

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6

浸泡在透析袋储存液中的透析袋取出使用前，须将透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净，内外冲洗三次方可。

小提示：实验要求不高的可以用简易处理方法，即在沸水中煮10min即可使用。

04

下述透析程序是一个普遍的基础透析过程

在开始透析之前应考虑到许多变数。透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量，透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率，因此，一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化。

1.把适量的透析液（缓冲液）加入透析装置；

2.裁剪适当长度的透析管，预留一段额外长度；

3.把透析管插入打开的透析夹，在约超出透析夹3-5毫米的位置再夹住。不要折叠透析袋；

4.由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度，夹紧透析夹；

5.把透析样品放在合适的透析缓冲液中；

6.透析要根据具体的应用需求。通常情况下，允许过夜透析。在持续透析的过程中，至少要进行3次全部更换透析液。建议在（透析后）2-4小时，6-8小时和10-14小时（第2天早晨）更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行2小时的透析。

05

使用注意事项

a.透析袋不可以长期浸泡在纯水中，易被污染；

b.样品浓度不可太大；

c.样品和透析液体积比一般是1:50~500；

d.样品浓度越高，透析所需时间越长，透析液需要更频繁的更换；

e.在适当的储存情条件下，保质期为两年。（备注：一旦变潮湿，不要让透析袋干燥，会造成孔隙结构不可恢复的倒塌）。