1. 从液氮或-80℃冰箱中取出冻存细胞，马上放入37℃水浴锅中，并不时地搅拌，使细胞在2min内快速解冻。

2. 待其融化之后，用75%酒精擦拭冷冻管外部，在超净台中打开冻存管盖子，吸取细胞悬液加入至含有完全培养基的离心管中，低速离心5min后弃去上清液，再加入适量完全培养基轻轻吹打，使细胞重悬。

3. 将重悬后的细胞缓慢加入到含有培养液的培养瓶，十字轻晃细胞培养瓶令细胞分布均匀，然后放入恒温培养箱中进行培养。

1. 整个过程应在超净台中进行，注意严格使用无菌操作技术。

2. 解冻过程务必快速，如果复温速度太慢，会造成细胞损伤。

3. 冻存管放入水浴中注意用镊子夹住细胞冻存管并在水浴中不时晃动，使其受热均匀，并防止水浴时水进入细胞冻存管内造成污染。

4.打开细胞冻存管之前要用酒精棉球将冻存管消毒并晾干。

5.液氮操作有一定的危险性，打开液氮罐取出细胞冻存管时，戴上防护眼镜。